Phenotypic and genotypic characterization of Colombian clinical isolates of Sporothrix spp

Introduction. For over a century, Sporothrix schenckii was considered the sole species responsible for sporotrichosis. In 2007, scientific community confirmed the disease could be caused by various Sporothrix species. These species differed in their virulence factors and their antifungal sensitivity. Objective. This study aims to characterize 42 Colombian clinical isolates of Sporothrix spp. phenotypically and genotypically. Material and methods. Forty-two clinical isolates were characterized using phenotypic methods. It involved various culture media to determine their growth range at different temperatures and to assess the type and distribution of pigment and colony texture. Microscopic morphology was evaluated through microcultures, as well as the conidia diameter, type of sporulation, and morphology. Additionally, the assimilation of carbohydrates was selected as a physiological trait for species identification. Genotyping of 40 isolates was performed through partial amplification of the calmodulin gene, followed by sequence analysis. Results. Molecular studies enabled the identification of 32 isolates of S. schenckii and 8 isolates of S. globosa. The combination of phenotypic and genotypic methods eased these species characterizations and the recognition keys development based on parameters such as growth diameter at 25 and 30 °C, colony texture (membranous or velvety) on potato dextrose agar, and microscopic morphology with predominance of pigmented triangular, elongated oval globose, or subglobose conidia. Conclusions. Confirmation of the phenotypic characteristics and molecular analysis is crucial for identifying Sporothrix species and determining adequate treatment. This study represents the first phenotypical and genotypical characterization of clinical isolates of Sporothrix spp. reported in Colombia.

Introducción. Por más de un siglo se creyó que Sporothrix schenckii era la única especie responsable de la esporotricosis. Sin embargo, en el 2007, se consideró que podría ser causada por diferentes especies de Sporothrix, que difieren en sus factores de virulencia y su sensibilidad a los antifúngicos. Objetivo. Caracterizar fenotípica y genotípicamente 42 aislamientos clínicos colombianos de Sporothrix spp. Materiales y métodos. Se caracterizaron 42 aislamientos clínicos mediante métodos fenotípicos. Se usaron varios medios de cultivo para determinar el rango de crecimiento a diferentes temperaturas, el tipo y la distribución del pigmento, y la textura de las colonias. Se evaluó la morfología microscópica por microcultivos mediante la determinación del diámetro, el tipo de esporulación y la morfología de las conidias. La asimilación de carbohidratos se usó como una característica fisiológica para identificar las especies. La genotipificación de los 40 aislamientos se llevó a cabo mediante la amplificación parcial del gen que codifica para la calmodulina y se confirmó por secuenciación. Resultados. Mediante estudios moleculares, se identificaron 32 aislamientos de S. schenckii y ocho de S. globosa. La combinación de métodos fenotípicos y genotípicos permitió caracterizar las especies y construir claves para su reconocimiento, con base en parámetros como el diámetro de crecimiento a 25 y 30 °C, la textura de las colonias (membranosa, aterciopelada) en agar papa dextrosa y la morfología microscópica con predominio de conidias (triangulares pigmentadas, ovales globosas elongadas, subglobosas). Conclusiones. La caracterización fenotípica y los análisis moleculares son necesarios para identificar las especies de Sporothrix y, de esta forma, elegir el tratamiento indicado. Esta es la primera caracterización fenotípica y genotípica reportada de aislamientos clínicos colombianos de Sporothrix spp.

Nefroprotección en frío para reparo de ectasia aórtica y aneurismas ilíacos bilaterales ante la presencia de riñón ectópico pélvico / Cold nephroprotection for repair of aortic ectasia and bilateral iliac aneurysms in the presence of pelvic ectopic kidney

Resumen Los riñones ectópicos pélvicos solitarios asociados a degeneración aneurismática de las arterias ilíacas y la aorta abdominal son eventos muy raros. Los enfoques quirúrgicos para la corrección de aneurismas con compromiso renal son un desafío por la falta de consenso actual, en especial cuando cursan con riñones ectópicos pélvicos solitarios funcionales asociados. Por tal motivo, una de las estrategias que ha demostrado buenos resultados a corto y mediano plazo es la nefroprotección en frío, la cual puede ser usada con seguridad en estos pacientes. En el caso que se presenta, se evidenció una ectasia aórtica con aneurismas ilíacos bilaterales asociados con un riñón ectópico pélvico solitario en un paciente masculino de 75 años, con hipertensión arterial y dislipidemia. Se realizó una reconstrucción aortoilíaca bilateral y una reconstrucción de la arteria hipogástrica, además de reimplante de la arteria renal ectópica bajo irrigación renal en frío, sin complicaciones y preservación de la función renal.

Abstract Solitary pelvic ectopic kidneys associated with aneurysmal degeneration of the iliac arteries and abdominal aorta are very rare events. Surgical approaches for the correction of aneurysms with renal involvement are challenging due to the lack of current consensus, especially when they are associated with functional solitary pelvic ectopic kidneys. For this reason, one of the strategies that has shown good results in the short and medium term is cold nephroprotection, which can be used safely in these patients. In the present case, aortic ectasia with bilateral iliac aneurysms associated with a solitary pelvic ectopic kidneys was evidenced in a 75-year-old male patient with arterial hypertension and dyslipidemia. Bilateral aortoiliac reconstruction was performed with hypogastric artery reconstruction and reimplantation of the ectopic renal artery under cold renal irrigation, without complications and preservation of renal function.

Exposición intrauterina a disruptores endocrinos (ftalatos): fuentes de exposición y cuantificación de metabolitos urinarios / Intrauterine exposure to endocrine disruptors (phthalates): sources of exposure and quantification of urinary metabolites

Introducción: Los ftalatos son disruptores endocrinos usados en la fabricación de múltiples productos de la industria, principalmente plásticos. El periodo fetal representa la principal ventana de vulnerabilidad, y la exposición a ftalatos en esta etapa de vida genera efectos adversos fetales y postnatales. El biomarcador más fiable para medición de ftalatos es la orina. Objetivo: Caracterizar las diferentes fuentes de exposición a disruptores endocrinos y cuantificar la concentración urinaria de ftalatos en gestantes. Materiales y métodos: Estudio transversal, observacional y descriptivo que incluye 400 gestantes que asistieron a control prenatal en las instituciones de salud Génesis y Metrosalud (Medellín-Colombia). Se caracterizaron fuentes de exposición, se recolectó muestras de orina de todas las gestantes, y cuantificó la concentración de ftalatos de 38 mujeres. Resultados: Las medias geométricas de ftalato Di(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP), Mono-n-butyl phthalate(MnBP), Mono-2-ethyl-5-hydroxyhexyl phthalate(MEHHP) y Mono-2-ethyl-5-oxohexyl phthalate(MEOHP) fueron 162,72µg/L, 58,5 µg/L, 33,93µg/L y 31,63µg/L respectivamente. Conclusiones: La mayoría de las gestantes evaluadas han estado expuestas a lo largo de su vida a fuentes potenciales de disruptores endocrinos, presentes en químicos domésticos, tabaco y uso frecuente de cosméticos faciales y corporales. Las concentraciones de MnBP, MEHHP y MEOHP en orina de las participantes, fueron superiores a los hallazgos a nivel mundial.

Introduction: Phthalates are endocrine disruptors used in the manufacture of various industrial products, mainly plastics. The fetal period represents the principal window of vulnerability, and the exposure to Phthalates in this stage of life generates adverse fetal and post-natal effects. The most reliable biomarker for the assessment of Phthalates is urine. Objective: To characterize the different exposure sources of endocrine disruptors and quantify the urinary concentration of Phthalates in pregnant women. Materials and methods: A cross-sectional, observational, and descriptive study which included 400 pregnant women who received prenatal care in the Genesis and Metrosalud health institutions (Medellín-Colombia). Exposure sources were characterized and urine samples were collected from all pregnant women and the Phthalate concentration was quantified in 38 women. Results: The geometric measures of Phthalate Di(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP), Mono-n-butyl phthalate(MnBP), Mono-2-ethyl-5-hydroxyhexyl phthalate(MEHHP) and Mono-2-ethyl-5-oxohexyl phthalate(MEOHP) were 162.72µg/L, 58.5 µg/L, 33.93µg/L and 31.63µg/L respectively. Conclusions: The majority of pregnant women that were evaluated were exposed to potential sources of endocrine disruptors throughout their life, which are present in household chemicals, tobacco, and frequent use of facial and body cosmetics. The concentrations of MnBP, MEHHP y MEOHP in urine of participants were higher than those found worldwide.

Incidencia, mortalidad y supervivencia por cáncer de endometrio en Manizales, Colombia 2003-2017 / Incidence, mortality and survival of endometrial cancer in Manizales, Colombia 2003-2017

RESUMEN Objetivo. Estimar la incidencia, mortalidad y supervivencia a cinco años por carcinoma endometrial en Manizales, para el periodo 2003-2017. Materiales y métodos. Estudio observacional, retrospectivo, de base poblacional, con alcance descriptivo. Se ajustaron tasas de incidencia y mortalidad mediante el método directo usando la población mundial Segi como referencia. Se realizó seguimiento pasivo y activo de los casos hasta completar 60 meses o hasta la fecha de cierre de seguimiento. La supervivencia fue estimada mediante funciones de Kaplan-Meier y modelos de regresión de Cox. Resultados. Se observaron 210 casos incidentes en una población de 214 928 mujeres. La edad promedio al diagnóstico fue de 61 años. El tipo histológico más frecuente fue el endometrioide, bien diferenciado. La mayoría de las pacientes estaban afiliadas al régimen contributivo y pertenecían al nivel socioeconómico medio. La tasa de incidencia ajustada por edad fue de 5,7 casos nuevos por cada 100 000 mujeres-año. Se identificaron 75 defunciones con mayor mortalidad entre los 64 y los 79 años. La supervivencia global fue de 95,1% a los 12 meses y de 83,8% a los 60 meses. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas en la supervivencia a favor de la histología epitelial, los estadios tempranos al momento del diagnóstico y la edad al diagnóstico menor a 60 años. Conclusiones. La mortalidad es similar a la reportada en otros países de la región. En Manizales, la sobrevida al cáncer de endometrio fue mayor en pacientes con diagnóstico temprano, con edad menor de 60 años y con histología endometrioide.

ABSTRACT Objective. To estimate the incidence, mortality and five-year survival of endometrial carcinoma in Manizales for the period 2003-2017. Materials and methods. Observational, retrospective, population-based study, descriptive in scope. Incidence and mortality rates were adjusted by the direct method using the Segi world population as reference. Passive and active follow-up of the cases was carried out until completing 60 months or until the follow-up closing date. Survival was estimated using Kaplan-Meier functions and Cox models. Results. 210 incident cases were observed in a population of 214.928 women. The average age at diagnosis was 61 years. The most frequent histological type was endometrioid, well differentiated. Most of the patients were affiliated to the contributory health insurance scheme and belonged to the middle socioeconomic level. The age-adjusted incidence rate was 5.7 new cases per 100,000 woman-years. Seventy-five deaths were identified, with greater mortality between 65-69 and 75-79 age groups. Overall survival was 95.1% at 12 months and 83.8% at 60 months. Statistically significant differences were found in survival in favor of epithelial histology, early stages at the time of diagnosis, and age at diagnosis less than 60 years. Conclusions. Manizales follows the global pattern of rise in the age-adjusted incidence rate. Mortality is like that reported in other countries in the region. In Manizales, endometrial cancer survival was higher in patients with early diagnosis, less than 60 years of age, and with endometrioid histology.

Evaluación de una Vacuna Inactivada Oleosa del Virus de la Encefalitis Equina del Esteen Cobayos (Cavia porcellus) / Evaluation of an Oil Inactivated Vaccine of Eastern Equine Encephalitis Virus in Guinea Pigs (Cavia porcellus)

Se evaluó la inmunogenicidad y seguridad de una vacuna oleosa contra el virus de la encefalitis equina del Este, inactivada con etilenimina binaria, en tres formulaciones: Formulación I (F1): antígeno-fase oleosa; Formulación II (F2): antígeno-fase oleosa-medio de mantenimiento; Formulación III (F3): antígeno-fase oleosa-antígeno. Se evaluó la inmunidad durante un año (21, 30, 90, 160, 250, 305 y 365 d), utilizándose 70 cobayos (Cavia porcellus) de 3 a 4 meses de edad y 250 a 300 g de peso vivo, distribuidos al azar en 7 grupos de 10, para un total de siete tratamientos, a saber: Tratamiento 1 (T1): vacunados con una dosis de F1; Tratamiento 2 (T2): vacunados con dos dosis de F1; Tratamiento 3 (T3): vacunados con una dosis de F2; Tratamiento 4 (T4): vacunados con dos dosis de F2; Tratamiento 5 (T5): vacunados con una dosis de F3; Tratamiento 6 (T6): vacunados con dos dosis de F3; Tratamiento 7 (T7): no vacunados. Los cobayos se desafiaron a los 355 d post-vacunación vía intraperitoneal. Se detectó títulos de anticuerpos por inhibición de la hemoaglutinación (IH) ≥20 y por seroneutralización (SN) ≥40, a los 21 d post-vacunación cuando se usó una dosis. El ascenso máximo de anticuerpos por IH se observó a los 90 d, persistiendo e incrementándose en el desafío con una y dos dosis, a los 365 d post- vacunación. Formulaciones con dos dosis tuvieron mayores títulos en todos los períodos, siendo la F3 la que presentó los mayores títulos, seguida de la F2 y la F1, respectivamente (P<0,01). Los títulos de anticuerpos aumentaron después del desafío, siendo mayores en tratamientos con dos dosis (P<0,01). Los cobayos vacunados no desarrollaron enfermedad neurológica o viremia después del desafío. Se concluye que las formulaciones con una y dos dosis indujeron una respuesta de anticuerpos satisfactoria en cobayos durante un año.

The immunogenicity and safety of an oil vaccine against the eastern equine encephalitis virus, inactivated with binary ethylenimine in three formulations was evaluated: Formulation I (F1): antigen- oil phase; Formulation II (F2): antigen- oil phase-maintenance medium; and Formulation III (F3): antigen- oil phase-antigen. Seventy guinea pigs (Cavia porcellus) 3 to 4 months of age and 250 to 300 g of live weight were used to assess immunity for a year (21, 30, 90, 160, 250, 305 and 365 days). Animals were distributed at random in 7 groups of 10, for a total of seven treatments, as follows: Treatment: 1: vaccinated with one dose of F1; Treatment 2: vaccinated with two doses of F1; Treatment 3: vaccinated with one dose of F2; Treatment 4: vaccinated with two doses of F2; Treatment 5: vaccinated with one dose of F3; Treatment 6: vaccinated with two doses of F3; and Treatment 7: not vaccinated. The guinea pigs were challenged 355 days postvaccination through theintraperitoneal route. Antibodies titers were detected by hemoagglutination inhibition (HI) ≥ 20 and serum neutralization (SN) ≥40 to 21 days postvaccination with one dose. The maximum rise of antibodies with the HI was observed at 90 days, which persisted and increased in the challenge with one and two doses, 365 d postvacccination. Formulations with two doses showed the highest titers in all periods, being F3 the one which higher titles, followed by F2 and F1, respectively (P<0.01). Antibody titers increased after challenge, beinf higher with two doses. (P<0.01). Vaccinated guinea pigs did not develop neurologic disease or viremia after challenge. It is concluded that formulations with one and two doses, induced a satisfactory antibody response in guinea pigs for one year.

Desarrollo de una Vacuna Inactivada Oleosa con Cepa Venezolana del Virus de la Encefalitis Equina del Este / Oil Inactivated Vaccine Development with Venezuelan Strain of Eastern Equine Encephalitis Virus

Se utilizó la cepa El Pao de encefalitis del este venezolana, aislada en el 2002 (EE VE02 EL PAO) como antígeno, para producir una vacuna inactivada oleosa contra el Virus de la Encefalitis Equina del Este (VEEE) en tres formulaciones, a saber: formulación I (F1): antígeno-fase oleosa; formulación II (F2): antígeno-fase oleosa-medio de mantenimiento y formulación III (F3): antígeno-fase oleosa-antígeno. La suspensión de virus se obtuvo en monocapa de cultivo de células de riñón del mono verde africano. Como inactivante se usó la etilenimina binaria (BEI) con adyuvante incompleto de Freund. Se realizaron pruebas de identidad, carga viral, esterilidad, fisicoquímica, inocuidad, potencia, inmunidad y viabilidad. Todas estas pruebas de control de calidad fueron satisfactorias. Cuando las formulaciones se administraron a cobayos, estimularon títulos de anticuerpos por inhibición de la hemoaglutinación ≥ 20 y de seroneutralización ≥ 40, a los 21 d postvacunación con 1 dosis de 1 mL por vía subcutánea. No se observaron diferencias estadísticamente significativas (P>0,05) en la detección de anticuerpos entre las formulaciones a los 21 días posvacunación, aunque la F3 presentó mayores títulos, seguida de la F2 y la F1, respectivamente (P<0,01). Los anticuerpos neutralizaron in vitro las cepas virulentas del VEEE, y los cobayos vacunados no desarrollaron viremia ni enfermedad neurológica con el desafío de virus vivo, tanto por vía intracerebral como por vía intraperitoneal, en las pruebas de potencia. Se concluye que la vacuna es segura y provee una excelente protección contra la infección del VEEE.

The Pao of eastern encephalitis venezuelan isolated in 2002 (EE VE02 EL PAO) strain was used as an antigen to produce an inactivated oil vaccine against the Eastern Equine Encephalitis Virus (EEEV) in three formulations, as follows: Formulation I (F1): antigen in oil phase; Formulation II (F2): antigen in oil phase-maintenance medium; and Formulation III (F3): antigen-oil phase-antigen. The virus suspension was obtained from African green monkey kidney monolayer cell cultures. The binary ethylenimine (BEI) was used to inactivate the virus, along with an incomplete Freund´s adjuvant. The following quality control tests were performed: identity, viral load, sterility, physicochemical, safety, potency, immunity, and viability. All these tests were satisfactory. The administration to guinea pigs of a single subcutaneous dose of 1 mL of the formulations, caused stimulated antibody titers by hemagglutination inhibition (≥ 20) and serum neutralization (≥ 40), respectively, at 21 days post-vaccination. No statistically significant differences (P> 0.05) in the detection of antibodies between formulations at 21 days post-vaccination were observed, although F3 had higher titles, followed by F2 and F1, respectively (P<0.01). The antibodies neutralized EEEV virulent strains in vitro and the vaccinated guinea pigs did not develop viremia or neurological disease, when challenged with live virus, both intracerebrally and intraperitoneally in potency tests. It is concluded that the vaccine is safe and provides excellent protection against EEEV infection.

Cirugía cardiaca en ancianos Epidemiología, calidad de vida y funcionalidad postoperatoria / Heart surgery in the elderly Epidemiology, quality of life and postoperative functionality

Objetivo: describir la epidemiología de los pacientes llevados a cirugía cardiaca en el periodo entre 2004 y 2008, y valorar la funcionalidad y la calidad de vida postoperatoria en un subgrupo. Material y métodos: estudio descriptivo de corte transversal. Análisis estadístico se realizó en epiinfo 2000 versión 3.5.3 de 2011 y una p < 0.05 se consideró estadísticamente significativa. La calidad de vida se evaluó con SF-12v2 y se aplicaron la escala de Barthel y de Lawton para la valoración de la funcionalidad. Resultados: el promedio de edad fue 68.6 años, 2.4% ≥ 80 años. La mortalidad global hospitalaria fue 10.3% (9.2% para revascularización, 11.1% para cambio valvular y del 16.7% para cirugía mixta). El promedio del componente de salud física fue 43.7 vs 49.6 (población de referencia), y el del componente de salud mental fue 53.2 vs 49.3. 79.4% mejoran la autopercepción en salud posterior a la cirugía, 94.1% eran independientes en su ABC físico y 85.3% requerían alguna ayuda en sus actividades instrumentales. Conclusiones: es el primer estudio en nuestro medio que describe la epidemiología de un grupo de pacientes ancianos llevados a cirugía cardiaca y que evalúa calidad de vida y funcionalidad; se evidenció una repercusión positiva en la calidad de vida, funcionalidad y en la autopercepción de salud. A nivel instrumental se evidenció mayor compromiso de las actividades que requieren movilidad y participación social, siendo el sexo femenino y la edad avanzada los factores de mayor impacto negativo. (Acta Med Colomb 2014; 39: 118-123).

Objective: to describe the epidemiology of patients undergoing cardiac surgery in the period 2004 to 2008 and evaluate the functionality and postoperative quality of life in a subgroup. Material and methods: a descriptive cross-sectional study . Statistical analysis was performed in Epi Info 2000 version 3.5.3 2011 and p < 0.05 was considered statistically significant. Quality of life was assessed by SF-12v2 and Barthel and Lawton scale for assessing the functionality was applied. Results: mean age was 68.6 years, 2.4% ≥ 80 years. The overall hospital mortality was 10.3 % (9.2 % for revascularization, valve replacement 11.1% and 16.7% for joint surgery). The average physical health component was 43.7 vs 49.6 ( reference population) and the mental health component was 53.2 vs 49.3. 79.4% improve health self-perception after surgery, 94.1% were independent in their physical ABC and 85.3% required some help in their instrumental activities. Conclusions: this is the first study in our environment describing the epidemiology of a group of elderly patients undergoing cardiac surgery that evaluates quality of life and functionality. A positive impact on quality of life, functionality and health self-perception was evidenced . At instrumental level, greater commitment of activities requiring mobility and social participation was evident. Female sex and advanced age were factors with greater negative impact. (Acta Med Colomb 2014; 39: 118-123).

Análisis filogenético de cepas Venezolanas del virus de la encefalitis equina del este / Phylogenetic Analysis of Venezuelan Strains of the Eastern Equine Encephalitis Virus

Se realizó un estudio molecular de cinco cepas de virus de encefalitis equina del este (VEEE) mediante secuenciación de productos obtenidos en el ensayo de transcriptasa reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR, por sus siglas en inglés). Secuencias de ~ 500 pb de la región 3’ no traducible del genoma se compararon con secuencias homólogas variantes Sur Americana (SA) y Norte Americana (NA) del complejo VEEE. La cepa EE VE02 EL PAO, con la cual se desarrolló una vacuna inactivada oleosa tuvo más similitud con la cepa EE VE76 EL DELIRIO, seguida por EE VE75 CATATUMBO,  EE VE96 MLLANO y EE VE84 TUCACAS respectivamente. La alineación de secuencias entre las cepas típicas reveló diferencias de 2,82 a 8,48 %. En tanto que, la cepa EE VE02 EL PAO difirió en un 8,86 % de la de Perú (EE PE-0,0155 del linaje III) y en un 38,08 % de la de EEUU (EE-PE-6 del linaje I, usada en vacunas comerciales). Los resultados indican que las cepas autóctonas tuvieron más similitud con la cepa SA, que con la NA. Se han identificado cuatro principales linajes en el complejo de VEEE (I-IV). El árbol filogenético evidenció dos clado: uno que agrupa los linajes I-III y el otro, el linaje IV. La mayoría de las secuencias están contenidas en el primer clado que, a su vez, se separa en dos grupos que contienen secuencias del linaje I y secuencias de los linajes  II-III y, debido al valor bootstrap alto (99%), los grupos se consideran completamente distintos. Sin embargo, éste no es el caso del grupo que contiene a los linajes II-III porque éstos se separan sólo el 53% de las veces, pero se asume que las cepas venezolanas pertenecen al linaje III dividido en dos subclados: IIIA y IIIB.

A molecular study of five strains of the eastern equine encephalitis virus (EEEV) was conducted by sequencing of products generated using the reverse transcriptase assay, coupled to the polymerase chain reaction (RT-PCR). Sequences of approximately 500 pair of bases from the non-translated 3’ region of the genome were compared with homologous sequences of the South American (SA) and North American (NA) variants of the EEEV complex. The EE VE02 EL PAO strain, used to develop an inactivated oil vaccine had most resemblance with the EE VE76 EL DELIRIO strain, followed by the EE VE75 CATATUMBO, the EE VE96 MLLANO and the EE VE84 TUCACAS strains, respectively. The alignment of sequences among typical strains revealed differences of 2.82 and 8.48%, respectively, while the EE VE02 EL PAO strain differed in 8.86% from the Perú strain (EE PE-0.0155, from lineage III) and in 38.08% from the NA strain (EE-PE-6, from lineage I, used in commercial vaccines). The results of the present investigation indicate that the autochthonous strains have more similarly with the SA strain than with the NA strain. Four major lineages (I-IV) in the EEEV complex have been identified. The phylogenetic tree evidenced two clades, one which groups lineages I-III and another, lineage IV. Most of the sequences are contained in the first clade, which at the same time, separates into two groups containing sequences of lineage I and lineages II-III; and, due to the high bootstrap value (99%) the groups are considered completely different. However, this was not the case of the group which enclosed the lineages II and III; because these only separate 53% of the time, but it is assumed that the Venezuelan strains belong to linage III, which diverges into two subclades: IIIA and IIIB.

Caracterización del Virus de la Encefalitis Equina del Este Mediante la Transcriptasa Reversa Reacción en Cadena de la Polimera y el Análisis del Polimorfismo de la Conformación de Cadenas Sencillas / Characterization of Eastern Equine Encephalitis Virus by Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction and Analysis of Single

El análisis de polimorfismo en la conformación de cadenas sencillas (SSCP, por sus siglas en inglés) se utilizó para caracterizar regiones del genoma de tres cepas de virus de encefalitis equina del este (VEEE), aisladas de cerebros de equinos muertos. Los segmentos de ARN fueron amplificados mediante la transcriptasa reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). Se analizó un fragmento de 542 pb de la región 3’no traducible del ARNm 26S y un fragmento de 532 pb del gen de la proteína no estructural P4 (nsP4), encontrándose que la migración de las cadenas sencillas de estos fragmentos de ADNc fueron diferentes en estos aislados virales, lo que indica que presentan polimorfismo genético en estas regiones del genoma, el cual es característico de cepas de VEEE, variantes Sur Americanas.

The single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis was developed to characterize RNA segments of the genome in three strains of virus eastern equine encephalitis (EEEV), isolated from dead equine brains. The RNA segments were amplified by the reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The analyses of the 542 pb fragment from the 3’ untranslated region of the 26S mRNA and the 532 pb fragment of the nonstructural P4 protein (nsP4) gene were performed. The results of the present investigation show that the migration of the single strands of the c-DNA fragments was different in these isolated viruses, which indicate genetic polymorphism in these genome regions, which is characteristic of EEEV strains from South American varieties.

Evaluación de la actividad antimicrobiana de los extractos etanólicos de Azadirachta indica / Evaluation of the antimicrobial activity of Azadirachta indica ethanolic extracts

La presencia del acné juvenil, es una enfermedad que repercute directamente en la autoestima del adolescente, provocando en ocasiones inseguridad para establecer comu nicación y relaciones con otras personas, debido a su falta de confianza y respeto a su imagen. Debido a los altos costo del tratamiento para esta patología, el siguiente trabajo tuvo como objetivo determinar la actividad antimicrobiana de la Azadirachta indica y preparar una fórmula magistral (crema) antiacné. Los resultados obtenidos de la actividad antibacteriana de los extractos etanólicos de las hojas de Azadirachta indica A. Juss, mostraron que el Staphylococcus aureus presentó la mayor sensibilidad con una zona de inhibición de 15 mm. a una dilución 1/10; E. faecalis, con una sensibilidad de 7 mm, tanto en las diluciones 1/10 y 1/100; K. pneumoniae, con una zona de inhibición de 8 mm. y E. coli; mostró ser resistente a todas las diluciones ensayadas. Esta búsqueda sugiere que los principios activos extraídos con etanol de las hojas, pueden jugar un rol significativo en la acción inhibitoria contra el Staphylococcus aureus responsable del acné juvenil.

The presence of the youthful acne, is a disease that directly repels in the self-esteem of the adolescent, causing sometimes insecurity to contact and relations with other people, due to its lack of confidence and respect to its image. Due to high the cost of the treatment for this pathology, the following work had as objective to determine the antimicrobial activity of the Azadirachta it indicates and to prepare a skillful formula (Cream) antiacne. The obtained results of the antibacterial activity of the etanólicos extracts of the leaves of Azadirachta indica A. Juss, showed that the Staphylococcus aureus presented/displayed greater sensitivity with a zone of inhibition of 15 mm to a dilution 1/10; E. faecalis, with a sensitivity of 7 mm, as much in dilutions 1/10 and 1/100; K. pneumoniae with a zone of inhibition of 8 mm and E. coli, showed to be resistant all the tried dilutions. This search suggests them extracted active principles with ethanol of the leaves, can play a significant roll in the inhibiting action against the Staphylococcus aureus responsible for the youthful acne.

Ensayo clínico con polvo de musa paradisiaca en el tratamiento intercrisis del asma bronquial en adultos / Clinical assay using powder from Musa paradisiaca in interseizures treatment of bronchial asthma in adults

Se realizó un ensayo clínico controlado, paralelo y a doble ciegas para evaluar la utilidad de las cápsulas de polvo de Musa paradisiaca en el tratamiento intercrisis del asma bronquial. Participaron 66 pacientes asmáticos adultos (grados I, II y III), que recibieron por períodos de 12 a 20 semanas dosis entre 19 y 47 mg/kg del producto o un placebo. Se estudió el comportamiento clínico de los pacientes y la aparición de reacciones adversas. No existieron diferencias significativas en las variables estudiadas entre el grupo tratado y el control. Concluimos que el polvo de Musa paradisiaca careció de utilidad terapéutica en el presente estudio

Eritropoyetina recombinante humana (r-HuEPO) en pacientes con insuficiencia renal crónica

Se presentan 43 pacientes con insufiencia renal crónica (IRC), en hemodíalisis, con hemoglibina (HB) menor de 8 gr/dL. Se excluyeron quienes presentaron anemias por deficiencia de ácido fólico, B12, HTA de difícil control, drogadicción, hiperparatiroidismo e intoxicación por aluminio. Se administraron por vía venenosa 50 U/kg tres veces por semana de eritropoyetina recombinante humana (r-HuEPO). La edad promedio fue 40+- 17 años, con predominio del sexo masculino (57 por ciento). Después de 12 semanas de tratamiento, la Hb aumentó de 7.1+-1 a 10.5+- 1.6 gr/dL (p<0.001). Se observó una discreta leucocitosis, los niveles séricos de Na, K, Ca, Po4, Cr, aminotransferars y bilirrubinas no presentaron cambios significativos. El hierro y la ferritna sérica disminuyeron en repuesta al incremento del número de globulos rojos. Hubo aumento de la presión arterial en 17 por ciento y un paciente presentó trombosis de la fistula A-V. Conclusión: la r-HuEPO es segura y efectiva en el tratamiento de la anemia secundaria a IRC.